Durchflusszytometrie가 아니었나요?
Bei der Durchflusszytometrie werden Laser eingesetzt, um verschiedene Arten von Zellen und anderen biologischen Partikeln zu zählen oder zu sortieren. Wenn Sie ein Blutbild von Ihrem Arzt erhalten, wird die Analyze mittels Durchflusszytometrie durchgeführt. Sie wird auch in der Forschung, in der Pharmazie und sogar in der Viehzucht verwendet.
그래서 funktioniert Durchflusszytometrie
죽어라Durchflusszytometrieist eine weit verbreitete Methode zur zerstörungsfreien Analyze (Zählung) und/oder Sortierung von Zellen, Spermien und anderen kleinen Bioeinheiten anhand von Eigenschaften, die optisch gemessen werden können. Dabei werden die Zellen im Gänsemarsch durch eine Fließzelle gezwungen, wobei häufig eine Fließmethode namens Hydrodynamische Fokussierung verwendet wird.
In der sogenannten Interaktionszone werden die Zellen dann mit einer Reihe von einem oder mehreren fokussierten Laserstrahlen abgefragt. (Siehe die Abbildung unten.) Die daraus resultierende Streuung und (Stokes-verschobene) Fluoreszenz wird von einer Optik aufgefangen und durch Filter in diskrete Wellenlängenbereiche getrennt. Die Lichtmenge in jedem Band wird dann mit einem Photodetektor gemessen.
Wie Durchflusszytometrie Zellen 미스트
Bei der Analyze von Blutzellen in Forschungs- und klinischen Labors werden die Zellen zunächst mit verschiedenen Fluoreszenzmarkern(Fluorochromen) behandelt. Diese werden mithilfe der Antikörper-Biochemie so hergestellt, dass sie nur an bestimmte Antigene (in der Regel Proteine) auf der Außenseite der Zellen anhaften. In einigen Anwendungen können auch intrazelluläre Inhalte wie DNS in irgendeiner Weise floreszierend markiert werden.
Während jede markierte Zelle die Interaktionszone durchläuft, kann die Analyze derrelativen Intensitäten in den Wellenlängenbereichen verwendet werden, um die Population in Abhängigkeit von verschiedenen Parametern zu zählen, typischerweise unter 다변량 매개변수 분석에 대한 설명. Darüber hinaus kann die Lichtstreuung in wichtigen Winkeln (Vorwärtswinkelstreuung und Seitenwinkelstreuung) gemessen werden, um die Form der Zelle zu bestimmen.
Durchflusszytometrie mit 다중 매개변수
Der Begriff 다중 매개변수-Durchflusszytometrie bezieht sich auf Instrumente und Protokolle für die Zählanalyse, die Dutzende von verschiedenen Zellenparametern testen können. Dazu müssen mehrere Laserwellenlängen verwendet werden.
Ein herkömmliches Durchflusszytometer verwendet in der Regel die gleichen vier Laserwellenlängen: 405 nm, 488 nm 및 640 nm, 선택적으로 561 nm. Einige der komplexeren Multiparameter-Instrumente können jedoch bis zu zu verwenden Laser verwenden. Diese Instrumente umfassen zunehmend eine oder mehrere Ultraviolette Wellenlängen, um die Bandbreite des Instruments über das sichtbare Spektrum hinaus zu erweitern und damit die Gesamtzahl der Parameter zu erhöhen. Einige dieser Instrumente können auch mehr als 100 Separate Fotodetektoren enthalten.
다중 Wellenlängen을 갖춘 레이저 엔진
Hersteller von konventionellen und Multiparameter-Durchflusszytometrie-Instrumenten setzen zunehmend auf Multi-Wellenlängen-Laser-Engines, die mehrere Laser, die Fokussierungsoptik und die Steuerelektronik in einem kompakten, abgedichteten Gehäuse 통합. Dies vereinfacht den Zusammenbau und die Ausrichtung des Geräts und erhöht außerdem seine Zuverlässigkeit und die Zeit zwischen den Wartungen.
Fluoreszenzaktivierte Zellsortierer (FACS)
Für einige Forschungsanwendungen wie Onkologie, Immunologie und Wirkstoffentwicklung kann die Durchflusszytometrie zum Sortieren von Zellen verwendet werden, d. 시간. zum selektiven Sammeln eines bestimmten Zelltyps, während alle anderen aussortiert werden. In einem floreszenzaktivierten Zellsortierer (FACS) fließt der Strom vor der Interaktionszone durch eine Düse, die dafür sorgt, dass die Zellen einzeln in winzigen Tröpfchen gehalten werden, die eine geringe statische Ladung von der Düse aufnehmen. Elektrostatische Plattenelektroden werden dann aktiviert, um ein Feld zu erzeugen, das die geladenen Tröpfchen in ein Sammelröhrchenablenkt, je nach dem vom Computer des Geräts registrierten Zelltyp.
Abbildung 2: Zellsortierung mit Durchflusszytometrie. Die elektrostatische Ablenkung wird verwendet, um die Sammlung von Zellen, Spermien oder anderen Zielobjekten entsprechend ihrer Fluoreszenz- und/oder Streusignatur zu steuern.
Die Sortierung mittels Durchflusszytometrie wird auch in der Tierhaltung und Fischzucht eingesetzt. In der Tierzucht wird das Sperma von Rindern nach Geschlecht sortiert: Es gibt eine Präferenz für weibliche Spermien bei Milchkühen und männliche Spermien bei Rindern. Hier werden die Spermien des "falschen" Geschlechts durch einen weiteren Laserstrahl zerstört. Bei der Zucht von gentechnisch veränderten Fischen können die Eier sortiert werden, um sicherzustellen, dass nur 멸균 erwachsene Fische gezüchtet werden, sodass kein Risiko besteht, dass entkommene Fische den Genpool der einheimischen Fische kontaminieren.
Durchflusszytometrie: Zelltests 최적화
Durchflusszytometriewird täglich für Normale Bluttests, in der Zellforschung und in der Tierzucht verwendet. Der Einsatz von Lasern und Fluoreszenz in der Durchflusszytometrie hat die Art und Weise revolutioniert, wie ärzte und Wissenschaftler Zellen 분석. Vor der Durchflusszytometrie verfügten Wissenschaftler und ärzte über Mikroskope und verschiedene chemische Testverfahren. Das Zählen der Zellen erfolgte Normalerweise manuell – ein mühsamer, zeitaufwändiger und potenziell fehleranfälliger Prozess. Die Durchflusszytometrie hat Zelltests optimiert und ärzten und Wissenschaftlern die Möglichkeit gegeben, mehr Tests durchzuführen und mehr Daten in kürzerer Zeit zu sammeln.