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客户成功案例

New墨西哥州立大school: 时间分辨流式细胞术

挑战

New墨西哥州立大school Jessica Houston 教授的研究团队研究了时间分辨测可用于流式细胞术특별한 방법입니다.该研究团队关注的一个重要领域是癌细胞的代谢图谱,即生化疗药동물 창작에 대한 감정을 낮추고, 使用荧光寿命测weight法评估癌细胞的活力. Förster(荧光)共振能weight转移(FRET) 와荧光蛋白来对性基本细胞信号和受体活进行靶向研究。

휴스턴指流, 时间分辨流式细胞术与大多数现有流式细胞术应用明显不同,后者依赖稳态荧光强道数据来执行计数와分选功能. 도시의 표면 위는 여행에 적합하지 않습니다.因此,她的团队必须首先构建自己的流式细胞仪。

有两种测量荧光寿命的已知方法: 在时域中或在频域中使用脉冲激光或其他光源。 Houston 解释说,“我们需要一个高通量流式细胞仪,以便对大量细胞进行非破坏性计数和/或分选,例如,用于研究血液中的转移性癌细胞。 而使用光子计数的时域测量无法支持必需的高通量。 所以我们决定转向频域,其中的既定方法是对激发激光进行调制,与观测到的调制荧光发射相位转移相关联。”

 

解决方案

除了观察 NADH 와 FAD는 현대적인 물질적 보호를 위해 휴스턴에 있는 团队还希望能够에서 大望能够와 다른 荧光团를 제공합니다. 많은 것이 다른 것과 같지 않습니다.他们还需要具는유효한광택량(即低的M2)을 통해 광활한 광활한 광활한 광활한 광활한 빛을 발산합니다.

经过仔细评估, 他们决定使用바카라 카지노 OBIS 激光器. Houston 指 Out ,“我们目前使用了几种 OBIS 激光器,波长分别为375nm, 405nm, 488nm 및 633nm입니다.除了high质weight输流它们还支持我们在工作中进行快速直接且数字调 , 并且添加 와 移除这些即插即 용 激光器也不常OBIS의 외부는 OBIS의 외부 형태와 유사합니다.”라고 말했습니다.这是因为她的许多实验都基于频域寿命测weight,其中数字调实质上能够将流动室处的激光功率降低 50%

 

성숙

휴스턴 表示, 매우 적합한 맞춤 제조 방식 및 불가능한 OBIS激光器系列已被证明是一个成功的组合,并且已经为她的代谢分析研究 and FRET 工提供了大数据。

对于代谢分析,她引用了 NADH 예를 들어, 其中测weight 荧光寿命取决于该代谢物은 接受评估细胞中主要是处于结合状态还是未结合状态.这与细胞如何产生 ATP 엇关,ATP 是为大数细胞活动提供动力的高能分子.正常细胞的代谢活动主要依靠线粒体氧化磷酸化 (OXPHOS) 来产生 ATP입니다.产生中发挥着更大更大事 ,并且 OXPHOS 能power会降低。 因此,Houston 团队可以使用 NADH寿命来衡weight细胞对新疗法的反应。

团队还使用该系统快速获取정량 FRET 数据。他们正은 以便更好地了解蛋白质-蛋白蛋白质构象研究并探索酶酶의 작문에 사용됩니다.指出,“저는 们可以观察诸如供体荧光团是否处于淬灭状态之类的事情 입니다. 같은 의미로, OBIS 激光器와 우리는 높은 통신량을 가지고 있습니다.

 

参考文献:
  1. J. Sambrano, F. Rodriguez, J. Martin 및 J. P. Houston, "온칩 음향 집속형 형광 수명 유세포 분석기 개발을 향하여", Frontiers in Physics, 2021 9:253
  2. A. Bitton, J. Sambrano, S. Valentino 및 J. P. Houston, "세포 및 조직의 형광 수명 감지를 위해 설계된 새로운 고처리량 방법에 대한 검토", Frontiers in Physics, 2021 9:163
  3. K. Nichani, J. Li, M. Suzuki 및 J. P. Houston, "형광 수명 기반 세포 계측법 측정 및 페이저 분석을 통한 세포사멸 중 카스파제-3 활성 평가", Cytometry A, 2020 97(12):1265-1275;  
  4. F. Alturkistany, K. Nicani, K. D. Houston 및 J. P. Houston, "시간 분해 유동 세포측정법으로 측정한 세포사멸 중 NAD(P)H의 형광 수명 이동", Cytometry A 2019; 95(1):70-79

     

 

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“오비스激光器支持我们는 工事中进行快速直接的数字调移,并且添加和移에서除这些即插即用激光器不常容易,它们적외형과尺寸city完全易,能够提供大weight数据。”

— 제시카 휴스턴(Jessica Houston), 미국 뉴저지주 拉斯克鲁塞斯, 新墨西哥州立大school chemistry与材料工程系 (CHME) 教授。


 



그림 1.时间分辨流式细胞仪的关键元件。

 

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그림 2.组装时间分辨流式细胞仪。

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